Terapia con Células Madre para Neumonía por Influenza A

Las células madre de la vía aérea distal producen alvéolos in vitro y durante la regeneración pulmonar después de la infección por influenza H1N1

Imagen tomada con fines académicos de https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0092867411011731

El objetivo del estudio es comprender el alcance y la secuencia molecular de la regeneración alveolar y el papel de las células madre en este proceso. El tipo de célula madre utilizado fue células madre bronquioalveolares, o BASC, que expresan tanto los marcadores de células Clara (CC10) como los marcadores de células alveolares tipo II (AT2), y linaje de las células Clara Scgb1a1 + (CC10) en ratones.  Se clonaron las células derivadas de vías respiratorias. Mediante marcadores celulares, se identificaron a las células que expresaban p63, en los bronquios y en el parénquima pulmonar lesionado por el virus. A pesar del daño extenso pulmonar, se demostró que células que expresan p63 en los bronquiolos sufren una expansión y dispersión masiva a los sitios del parénquima pulmonar afectado. De igual manera, se demostró que la célula madre de la vía aérea distal (DASC), tiene el potencial único de diferenciarse a los linajes alveolares, con lo que tienen un papel importante en la regeneración alveolar. A largo plazo, este estudio proporciona una guía para la mejora terapeútica de la regeneración pulmonar por células que expresan p63 en ensamblaje alveolar por DASC Humanos in vitro.

Clonación y seguimiento regional específico de células madre de Pulmón humano.

Imagen tomada con fines académicos de https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0092867411011731#bib7

Bibliografía:

1. Kumar PA., Hu Y., Yamamoto Y., Hoe NB., Seok Wei T., Mu D., et al. Distal Airway Stem Cells Yield Alveoli In Vitro and during Lung Regeneration following H1N1 Influenza Infection. Cell Press [Internet]. 2011 [Citado el 29 dic 19]; 147 (3): 525-538. Disponible en https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0092867411011731#bib7

Planta transgénica en la Neumonía viral

Lechuga transgénica  que expresa el antígeno de superficie, neuranimidasa, de la influenza H1N1 

Con el fin de desarrollar procesos alternativos para la producción de vacunas debido a la alta demanda global, se diseñó una planta transgénica llamada Lactuca sativa L. con la proteína Neuranimidasa de la cepa H1N1. El vector de expresión de la planta se denominó pKcNAn, y fue introducido en la lechuga por transformación mediada por Agrobacterium. El método de obtención fue Knock In. Los ratones  que fueron inoculados con extractos de lechuga transgénica mostraron una respuesta inmune contra el antígeno NA; lo cual demuestra que la Neuranimidasa producida en plantas es antigénica y genera inmunogenicidad contra el virus de la influenza altamente patógena.

Análisis de PCR para detectar el gen de Neuranimidasa en Plantas Transgénicas

Imagen tomada con fines académicos de https://www.sciencedirect.com/science/article/abs/pii/S0304423812001203

Usos de Transgénicos

Ventajas
1. Se utilizan como modelos de investigación de enfermedades.
2. Se utilizan para la producción de productos terapéuticos (Biofármacos y vacunas).
3. Uso en terapia génica.
4. Alimentos con mejores propiedades alimenticias.
5. Aumento en la producción de alimentos.

Desventajas
1. Posibles efectos adversos en la salud humana, tales como alergias.
2.  Inestabilidad genética.
3. Invasión de ecosistemas.
4. Desconocimiento de efectos a largo plazo.
5. Resistencia a fármacos.

Bibliografía:
1. Lui CW., Chen JJW., Kang CC., Wu CH. Transgenic lettuce (Lactuca sativa L.) expressing H1N1 influenza surface antigen (neuraminidase). Scientia Horticulturae [Internet]. 2012[Citado el 22 dic 19]; 139: 8-13. Disponible en https://www.sciencedirect.com/science/article/abs/pii/S0304423812001203
2.  Alimentos Transgénicos.[Internet]. s.f.[Citado el 22 dic 19]. Disponible en https://alimentostransgenicos.info/organismos/

ADN recombinante artificial en Neumonía Viral

T: Producción de las proteínas recombinantes NS1 y NEP del virus de la influenza A H1N1 en Escherichia coli, purificación y obtención de anticuerpos monoclonales.
O: Tratamiento: Obtención de proteínas recombinantes para producción de anticuerpos anti-NS1 y anti-NEP.
G: Genes M y NS que codifican proteínas NEP y NS1.
E.R: No especifíca.
E.L: DNA Ligasa T4
V:  pQE-80L. Vectores recombinantes: pQNEP pmd 09 y pQ-NS1 pmd 09.
C.R: Procariota: E. coli BL21-NEP y BL21-NS1
M.T.G:  Transformación.
M.I.C: Cultivo, Cromatografía, Electroforesis, Western-blot, Determinación de proteínas por el método de Sedmak y Grossberg, Inoculación en ratones cepa BALB/c.

Expresión de las proteínas NEP y NS1 en E. coli BL21

Imagen tomada con fines académicos de https://repositorioinstitucional.buap.mx/bitstream/handle/20.500.12371/634/759217T.pdf?sequence=1&isAllowed=y

Bibliografía: 
1. Martínez MM. Producción de las proteínas recombinantes NS1 y NEP del virus de la influenza A H1N1 en Escherichia coli, purificación y obtención de anticuerpos monoclonales. Universidad Autónoma de Puebla: Tesis Doctoral [Internet]. 2017 [Citado el 15 dic 19]. Disponible en https://repositorioinstitucional.buap.mx/bitstream/handle/20.500.12371/634/759217T.pdf?sequence=1&isAllowed=y

Recombiación de ácidos nucleicos en la Naturaleza

Durante la meiosis, ocurre un fenómeno denominado Recombinación Homóloga, en el cual, a partir de dos genotipos de diferente procedencia se combinan y conforman un nuevo genotipo distinto. Es así que en secuencias similares y homólogas de ADN de los cromosomas apareados de los progenitores, se produce un entrecruzamiento. Tiene lugar en el crossing over de la meiosis I, y como consecuencia se da el intercambio de material genético, lo cual provoca una diversidad genética en la descendencia.  

Imagen tomada con fines académicos de https://www.genome.gov/es/genetics-glossary/Recombinacion-homologa

Bibliografía: 

1. Peiró P. Recombinación Homóloga. Universitat Autònoma de Barcelona [Internet]. 2017 [Citado el 08 dic 19]. Disponible en http://bioinformatica.uab.cat/base/documents/genetica_gen201617/portfolio/recombinaci%C3%B3n%20hom%C3%B3loga%202017_5_16P18_52_26.pdf

PCR de miRNAs y Microarray para el Diágnostico de Infección por Virus de la Influenza A.

Imagen tomada con fines académicos de https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC6039551/

La expresión diferencial de miRNAs se vincula con la Infección por el Virus de la Influenza A. Los niveles aumentados de miR-148 y la disminución de  niveles de miR-31 y miR-29a son biomarcadores diagnósticos para las de infecciones graves. En microarrays de miARN y PCR se hallaron miARN vinculados con la patogénesis de la enfermedad, entre los que hallamos niveles de miR-229-5p, -335, -664 y -1260 aumentados, mientras niveles de miR-18a,-26a,-30a,-34b,-185,-576-3p,-628-3p,-665,-765 y -1285 se encontraban disminuídos.

miRNA modulan la Replicación del Virus de la Influenza

Imagen tomada con fines académicos de https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC6039551/

Bibliografía:
1. Nguyen TH.,  Liu X., Zhong Su Z., Chen-Yu Hsu A.,  Foster P., Yang  M. Potential Role of MicroRNAs in the Regulation of Antiviral Responses to Influenza Infection.  Front Imunnol [Internet]. 2018 [Citado el 01 dic 19]. Disponible en https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC6039551/